Contoh buffer dalam biologi

Dalam sel dan organisme hidup, cairan yang mengelilingi dan di dalam sel dijaga pada pH konstan. PH dalam sistem ini sering kali penting untuk reaksi biokimia yang terjadi di dalam organisme. Untuk mempelajari proses biologis di laboratorium, ilmuwan menggunakan buffer untuk mempertahankan pH yang benar selama percobaan berlangsung.

Banyak buffer biologis awalnya digambarkan oleh Good dan rekannya pada tahun 1966 dan masih digunakan di laboratorium saat ini.

Cara kerja Buffer

Penyangga atau buffer hanyalah larutan yang mengandung asam lemah dan basa konjugasinya. Bila suatu asam ditambahkan ke dalam buffer, ia bereaksi dengan basa konjugat yang menghasilkan asam lemah dan hampir tidak mempengaruhi pH larutan.

Persyaratan Buffer

Sejumlah karakteristik akan membuat penyangga biologis efektif. Mereka harus larut dalam air, tapi tidak larut atau minimal larut dalam pelarut organik. Penyangga seharusnya tidak bisa melewati membran sel, karena hal ini dapat mempengaruhi perilaku sel. Buffer harus tidak beracun, sebaiknya tidak menyerap radiasi UV dan harus tetap inert dan stabil sepanjang proses percobaan. Komposisi suhu dan ion sebaiknya tidak mengubah pH atau kapasitas penyangga.

Loading...

Memilih Buffer yang sesuai

Penyangga yang dipilih harus memiliki pKa dalam kisaran optimum untuk proses yang diteliti. Penyangga dengan pKa lebih tinggi sesuai jika ada kemungkinan terjadi kenaikan pH selama percobaan, dan sebaliknya jika pH diperkirakan akan turun. Konsentrasi penyangga harus dioptimalkan, karena konsentrasi yang lebih tinggi dari 25mM mungkin memiliki kapasitas penyangga yang lebih baik namun dapat menghambat aktivitas seluler seperti enzim. Metode ini juga menentukan buffer mana yang akan digunakan; misalnya, dalam elektroforesis, penyangga dengan kekuatan ion rendah sesuai untuk mencegah agar matriks gel tidak memanas.

Bagaimana Mengubah pH Buffer

Karena pH dapat berubah dengan perubahan suhu, ilmuwan harus menguji pH buffer pada suhu di mana mereka akan melakukan percobaan. Tris adalah penyangga yang sangat rentan terhadap perubahan pH dengan suhu. Semua meter pH harus dikalibrasi pada suhu kerja. Aditif juga bisa mengubah pH, ​​membuat pengujian ulang perlu dilakukan. Untuk mengubah pH suatu asam, biasanya asam klorida, atau basa, biasanya natrium atau kalium hidroksida, ditambahkan; Hal ini harus dilakukan secara perlahan untuk mencegah inaktivasi atau perubahan kimia dalam buffer.

Contoh Buffer Biologis

Penyangga TE, yaitu 10 mM Tris · HCl dan 1 mM EDTA, sesuai pada sejumlah nilai pH untuk penyimpanan asam nukleat. Elektroforesis adalah metode umum untuk mempelajari protein atau asam nukleat; Proses ini menggunakan sejumlah buffer, termasuk buffer Tris-acetate-EDTA, Tris-glycine dan Tris-borate-EDTA. Penyangga ini mencegah pemanasan matriks gel dan dapat mengandung zat aditif seperti urea dan SDS, tergantung pada penyelidikan.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

Hisham.id © 2017 Frontier Theme